細(xì)胞培養(yǎng)常遇問(wèn)題集錦（六）

26、

▲問(wèn)：有時(shí)候細(xì)胞和細(xì)胞之間就會(huì)出現(xiàn)這種小黑點(diǎn)，高倍鏡下看少數(shù)在原地打轉(zhuǎn)，但是培養(yǎng)液不渾濁。那其中不會(huì)動(dòng)的是細(xì)菌嗎？

答：原地打轉(zhuǎn)的可能為黑膠蟲(chóng)，會(huì)動(dòng)的是細(xì)菌，細(xì)菌有鞭毛。黑膠蟲(chóng)是一種現(xiàn)象，身份可能是細(xì)菌，有鞭毛會(huì)游動(dòng)。

27、

問(wèn)：想問(wèn)一下，已經(jīng)使用三抗以及抗支原體的藥物培養(yǎng)細(xì)胞一周，但還是有少量黑膠蟲(chóng)，但細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)還好，這樣的話(huà)接下來(lái)還需要處理嘛？好像有一種有少量黑膠蟲(chóng)但不影響細(xì)胞狀態(tài)可以不做處理的說(shuō)法？

答：一周，黑膠蟲(chóng)數(shù)量減少，已經(jīng)見(jiàn)效了，但還是要繼續(xù)處理，因?yàn)楹谀z蟲(chóng)和細(xì)胞有此消彼長(zhǎng)的特點(diǎn)，細(xì)胞復(fù)蘇或剛傳代時(shí)，因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞狀態(tài)差，所以特別容易爆發(fā)黑膠蟲(chóng)，黑膠蟲(chóng)數(shù)量增多，當(dāng)細(xì)胞復(fù)蘇率增強(qiáng)時(shí)，黑膠蟲(chóng)數(shù)量會(huì)減少。

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問(wèn)：話(huà)說(shuō)養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，一直加雙抗，會(huì)對(duì)哪些實(shí)驗(yàn)有影響呢？之前聽(tīng)說(shuō)做干擾的時(shí)候，要撤雙抗。

答：一般做功能學(xué)實(shí)驗(yàn)，藥理學(xué)，毒理學(xué)，信號(hào)通路都要撤掉雙抗。

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問(wèn)：Cho傳代接種密度0.4 e5，4天才長(zhǎng)到11e5，是怎么回事？DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養(yǎng)基，是不是凍溶會(huì)影響？是cho細(xì)胞，搖瓶培養(yǎng)。

答：檢查一下?tīng)I(yíng)養(yǎng)體系是不是不適合，如不是，那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問(wèn)題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。

30、

問(wèn)：請(qǐng)問(wèn)怎么培養(yǎng)破骨細(xì)胞？怎么提取到培養(yǎng)的protocol？遇到一個(gè)情況，怎么消化也消化不下來(lái)，想從源頭找一找，是什么原因？

答：破骨細(xì)胞的培養(yǎng)方法主要有：骨髓機(jī)械分離法，骨髓細(xì)胞誘導(dǎo)法，脾干細(xì)胞誘導(dǎo)法，血液?jiǎn)魏思?xì)胞誘導(dǎo)法，小鼠RAW264.7細(xì)胞系誘導(dǎo)法及骨巨細(xì)胞瘤分離法。

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