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細(xì)胞培養(yǎng)常遇問(wèn)題集錦(六)
發(fā)布時(shí)間: 2021-12-01 點(diǎn)擊次數(shù): 1177次26、
▲問(wèn):有時(shí)候細(xì)胞和細(xì)胞之間就會(huì)出現(xiàn)這種小黑點(diǎn),高倍鏡下看少數(shù)在原地打轉(zhuǎn),但是培養(yǎng)液不渾濁。那其中不會(huì)動(dòng)的是細(xì)菌嗎?
答:原地打轉(zhuǎn)的可能為黑膠蟲(chóng),會(huì)動(dòng)的是細(xì)菌,細(xì)菌有鞭毛。黑膠蟲(chóng)是一種現(xiàn)象,身份可能是細(xì)菌,有鞭毛會(huì)游動(dòng)。
27、
問(wèn):想問(wèn)一下,已經(jīng)使用三抗以及抗支原體的藥物培養(yǎng)細(xì)胞一周,但還是有少量黑膠蟲(chóng),但細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)還好,這樣的話(huà)接下來(lái)還需要處理嘛?好像有一種有少量黑膠蟲(chóng)但不影響細(xì)胞狀態(tài)可以不做處理的說(shuō)法?
答:一周,黑膠蟲(chóng)數(shù)量減少,已經(jīng)見(jiàn)效了,但還是要繼續(xù)處理,因?yàn)楹谀z蟲(chóng)和細(xì)胞有此消彼長(zhǎng)的特點(diǎn),細(xì)胞復(fù)蘇或剛傳代時(shí),因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞狀態(tài)差,所以特別容易爆發(fā)黑膠蟲(chóng),黑膠蟲(chóng)數(shù)量增多,當(dāng)細(xì)胞復(fù)蘇率增強(qiáng)時(shí),黑膠蟲(chóng)數(shù)量會(huì)減少。
28、
問(wèn):話(huà)說(shuō)養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候,一直加雙抗,會(huì)對(duì)哪些實(shí)驗(yàn)有影響呢?之前聽(tīng)說(shuō)做干擾的時(shí)候,要撤雙抗。
答:一般做功能學(xué)實(shí)驗(yàn),藥理學(xué),毒理學(xué),信號(hào)通路都要撤掉雙抗。
29、
問(wèn):Cho傳代接種密度0.4 e5,4天才長(zhǎng)到11e5,是怎么回事?DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養(yǎng)基,是不是凍溶會(huì)影響?是cho細(xì)胞,搖瓶培養(yǎng)。
答:檢查一下?tīng)I(yíng)養(yǎng)體系是不是不適合,如不是,那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問(wèn)題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。
30、
問(wèn):請(qǐng)問(wèn)怎么培養(yǎng)破骨細(xì)胞?怎么提取到培養(yǎng)的protocol?遇到一個(gè)情況,怎么消化也消化不下來(lái),想從源頭找一找,是什么原因?
答:破骨細(xì)胞的培養(yǎng)方法主要有:骨髓機(jī)械分離法,骨髓細(xì)胞誘導(dǎo)法,脾干細(xì)胞誘導(dǎo)法,血液?jiǎn)魏思?xì)胞誘導(dǎo)法,小鼠RAW264.7細(xì)胞系誘導(dǎo)法及骨巨細(xì)胞瘤分離法。
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