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    原位裂解細(xì)胞的CAT分析法

    發(fā)布時間: 2021-12-15  點擊次數(shù): 1081次

    材料與儀器

    轉(zhuǎn)染細(xì)胞
    Triton裂解液
    培養(yǎng)皿 培養(yǎng)箱

    步驟

    1.  60 mm 培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞,用2 ml PBS洗1次。每培養(yǎng)皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。

    2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl Triton裂解液。用橡膠刮子將細(xì)胞刮離培養(yǎng)血,用1 000 μl 移液器將裂解物移入1.5  ml 微量離心管中。

    3.  微量離心1 min 除去細(xì)胞核,不可溶性蛋白。將上清轉(zhuǎn)入一個干凈的微量離心管中, 進(jìn)行CAT活性分析。

     


    同實驗其他方法

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