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小鼠皮脂腺的油紅染色實驗步驟
發(fā)布時間: 2021-12-12 點擊次數(shù): 2168次材料與儀器
器材:棕色可密封瓶、研缽、漏斗、定性濾紙、冷凍切片等試劑:① 油紅染料(稱取預(yù)先研磨粉碎的 0.5 g 油紅干粉,溶于少量異丙醇中,然后加異丙醇至 100 ml,棕色瓶密封(或錫箔紙包裹避光)4 ℃ 保存,為儲存液,可長期保存。用時油紅工作液需現(xiàn)配:取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混勻,定性濾紙過濾,稀釋后數(shù)小時內(nèi)用完)
② 異丙醇
步驟
小鼠皮脂腺的油紅染色實驗的基本過程可分為如下幾步:1. 將冷凍切片從冰箱中取出,晾干。2. 用 PBS 洗 3 次,每次 5 分鐘。3. 用 4% 多聚甲醛固定 5~10 分鐘。4. 用蒸餾水洗兩遍,每次 5 分鐘。5. 將切片放入 60% 異丙醇洗兩遍,每次 5 分鐘。6. 將切片放入油紅工作液染色 15 分鐘。7. 用 60% 異丙醇洗兩遍,每次 5 分鐘。8. 用蒸餾水洗兩遍,每次 5 分鐘。9. 蘇木素復(fù)染 2 分鐘。10. 水充分漂洗 10 分鐘,把周圍水分抹干。11. 封片劑封片,鏡檢。結(jié)果示例如圖 8-11-2 所示。注意事項
1. 由于脂肪易溶于有機溶劑,所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過冷凍切片染色來顯示。2. 做脂肪染色的冷凍切片不能太薄,過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。3. 蘇木素復(fù)染時間不能過長。4. 染色結(jié)果不能長期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。
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安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。
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