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    小鼠皮脂腺的油紅染色實驗步驟

    發(fā)布時間： 2021-12-12　　點擊次數(shù)： 2168次

    材料與儀器


    器材：棕色可密封瓶、研缽、漏斗、定性濾紙、冷凍切片等
    試劑：

    ① 油紅染料（稱取預(yù)先研磨粉碎的 0.5 g 油紅干粉，溶于少量異丙醇中，然后加異丙醇至 100 ml，棕色瓶密封（或錫箔紙包裹避光）4 ℃ 保存，為儲存液，可長期保存。用時油紅工作液需現(xiàn)配：取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混勻，定性濾紙過濾，稀釋后數(shù)小時內(nèi)用完）


    ② 異丙醇


    步驟


    小鼠皮脂腺的油紅染色實驗的基本過程可分為如下幾步：

    1. 將冷凍切片從冰箱中取出，晾干。

    2. 用 PBS 洗 3 次，每次 5 分鐘。

    3. 用 4％ 多聚甲醛固定 5～10 分鐘。

    4. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

    5. 將切片放入 60％ 異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

    6. 將切片放入油紅工作液染色 15 分鐘。

    7. 用 60％ 異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

    8. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

    9. 蘇木素復(fù)染 2 分鐘。

    10. 水充分漂洗 10 分鐘，把周圍水分抹干。

    11. 封片劑封片，鏡檢。結(jié)果示例如圖 8-11-2 所示。


    注意事項


    1. 由于脂肪易溶于有機溶劑，所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理，而通過冷凍切片染色來顯示。
    2. 做脂肪染色的冷凍切片不能太薄，過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。
    3. 蘇木素復(fù)染時間不能過長。
    4. 染色結(jié)果不能長期保存，應(yīng)盡快觀察及照相。


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