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qPCR中的相對定量是什么?
發(fā)布時間: 2021-10-14 點擊次數(shù): 2478次相對定量常用于測定兩個不同樣品中靶基因量的差異,例如使用實時RT-PCR法定量檢測mRNA水平的實驗。
進行相對定量實驗分析兩個不同樣品的實驗數(shù)據(jù)時,需要對數(shù)據(jù)進行歸一化處理,設置其中一個樣品的靶基因表達量為“1"。這個樣品稱為校準品,常使用表達恒定的內(nèi)參基因。
通常,校準品歸一化后,待測樣品靶基因表達量以比“1"增加或降低n倍來表示,來顯示表達量的差異。
值得注意的是,實驗必須從等量原料中取得校準品和待測樣品的靶基因,否則比較無意義。
與絕對定量相比,相對定量實驗優(yōu)點在于內(nèi)參基因的使用,能規(guī)避實驗操作產(chǎn)生的差異,而且不需要制作標準曲線。
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