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細胞培養(yǎng)之“黑膠蟲”的防治
發(fā)布時間: 2021-09-26 點擊次數(shù): 1854次“黑膠蟲"/“Nanobacteria"究竟是何方神圣?《生物化學與生物物理進展》雜志(PIBB)2020年第1期發(fā)表了題為細胞培養(yǎng)中“黑膠蟲"污染的檢測及防治一文。根據(jù)作者描述,“黑膠蟲"污染具有以下特征:
1. 培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別;
2. 低倍鏡下它是黑色的點點和細胞碎片沒有區(qū)別
3. 高倍鏡下它會做運動給你看,也能模仿細胞碎片和細胞分泌物的布朗運動。還有黑膠蟲“路癡"到處跑的。
4. 與細胞的數(shù)量成反比,細胞越多,它越少,細胞越少它越多
5. 細胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。
該科研成果除了得出這些結(jié)論外,還成功的鑒定出“黑膠蟲"為缺陷短波單胞菌屬新菌株,連名字都有了叫:Brevundimonas sp. GYBL3。
當然也有實驗結(jié)果表示:初感染黑膠蟲對細胞和實驗都沒有影響,但是后續(xù)細胞生長越來越慢,甚至停滯不長,黑點越來越多,直到細胞“全軍覆沒"。
黑膠蟲的防治:
1、盡量使用好的血清,但是好的血清一般價格高的離譜,經(jīng)濟條件不允許,也可以選用進口新生牛血清代替。建議如果使用的是好的血清可不必滅活,這樣可以減少“小黑點"的形成。
2、如果是貼壁細胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,就不太好處理啦,可以向其中少加一點滋養(yǎng)細胞。加滋養(yǎng)細胞對有黑膠蟲的剛復蘇的細胞很有效!要是復蘇很久的細胞,那就用PBS反復離心幾次 ,一般建議是800-1000轉(zhuǎn)3分鐘, 離心2到3次,重新種植,加四環(huán)素等抗黑膠蟲的藥物進行抑制,讓細胞盡快長起來,黑膠蟲就消失了。
3、換用信得過的塑料培養(yǎng)瓶。
4、停止復蘇,停止養(yǎng)細胞,*消毒所有用于細胞培養(yǎng)的一切用品,包括所用的培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)基,吸管,胰酶,孵箱,超凈臺、空間等等你能想到的和細胞培養(yǎng)相關(guān)的所有物品,當然也別忘了您的白大褂。
5、如果有其它可用的細胞,那么污染的細胞最好扔掉;如沒有,可試著用氯霉素 ,紅霉素,或四環(huán)素進行抑制,或選用黑膠蟲抑制劑。
6、minocycline具有抑制的作用,可以在換液的時候使用。由于黑膠蟲尚未明確鑒定出是什么生物,所以上述的處理方法不一定正確,可以供考慮采用。
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