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Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
發(fā)布時(shí)間: 2021-09-15 點(diǎn)擊次數(shù): 4468次Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
①微笑條帶
解析:由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致,多出現(xiàn)于較厚的凝膠
處理辦法:配膠時(shí)一定要充分混勻,待其充分凝固后再做后續(xù)試驗(yàn)
②帶出現(xiàn)紋理現(xiàn)象
解析:樣品不溶性顆粒
處理辦法:加樣前最好是離心一下樣品
③電泳條帶粗
(這是個(gè)內(nèi)參 β-actin)
解析:蛋白樣品沒有濃縮,量太大
④條帶出現(xiàn)好多洞洞
解析:轉(zhuǎn)膜的時(shí)候沒有把三明治里的氣泡干掉
Western Blot是生物學(xué)上一種非常常用的實(shí)驗(yàn)方法,與之相似的還有Southern Blot和Northern Blot。但 WB 失敗的情況也很多,有一些小技巧來(lái)盡量減少失敗的概率。
“我的 WB 又沒有雜出來(lái),太桑心了"
“哇靠你的 WB 又沒有雜出來(lái),用掉多少抗體了,還買進(jìn)口的!"
“哇靠你的 WB 又沒有雜出來(lái),卻一直一輪又一輪的占用著蛋白電泳儀,我等到黃花都謝了!"
這些聲音貫穿了很多人的整個(gè)研究生生涯,WB,虐你無(wú)數(shù)遍,然而鳳凰涅盤然后浴火重生,從 WB 中參悟到了正確應(yīng)對(duì)失敗的人生道理。而在正確應(yīng)對(duì)失敗的同時(shí),我們也要學(xué)會(huì)如何避免失敗。
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